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技術(shù)文章

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)該如何加樣和溫育?

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       ELISA試劑盒具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。
  ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在一、二孔平分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在一、二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從一孔、二孔中各取100μl分別加到三孔和四孔,再在三、四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在三孔和四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,ELISA試劑盒再在第五、第六孔平分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔平分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔平分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為90ng/L,60ng/L ,30ng/L,15ng/L,7.5ng/L)。
  ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其他各步操作相同)、待測樣品孔。
  配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
  洗滌:當(dāng)心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
  酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒是選用酶聯(lián)免疫法和化學(xué)顯色兩種技術(shù)復(fù)合查看的,對通常食物、藥品中殘留的農(nóng)藥、重金屬、食物添加劑等都能進(jìn)行有用的定型分析。
  選用多路管線光源、進(jìn)口濾光片等搶先地光譜儀器技術(shù)。
  加酶:每孔參與酶標(biāo)試劑50μl,空白孔在外。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品畢竟稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,悄悄晃動(dòng)混勻。
  ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)溫育:ELISA試劑盒用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
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